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aclarado suficientemente&#59; posiblemente act&#250;en inhibiendo el crecimiento del <span class="elsevierStyleItalic">Propionibacterium acnes</span> y mediante un efecto antiinflamatorio directo<span class="elsevierStyleSup">4</span>&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Los pacientes con acn&#233; son un reservorio considerable de cepas resistentes que pueden ser transferidas a contactos cercanos no afectados de acn&#233;<span class="elsevierStyleSup">5</span>&#46; La r&#225;pida inducci&#243;n de resistencia a antibi&#243;ticos del  <span class="elsevierStyleItalic">Propionibacterium acnes</span>&#44; acompa&#241;ada de brotes de acn&#233;&#44; ha sido descrita tras la aplicaci&#243;n de eritromicina y clindamicina t&#243;picas&#44; as&#237; como despu&#233;s de utilizar tetra-ciclina&#44; eritromicina y doxiciclina sist&#233;micas<span class="elsevierStyleSup">6&#44; 7</span>&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Los <span class="elsevierStyleItalic"> Propionibacterium acnes</span> resistentes a la eritromicina y clindamicina fueron detectados por primera vez al final de los a&#241;os setenta en Estados Unidos<span class="elsevierStyleSup">8</span>&#46; Desde entonces se han detectado en el Reino Unido&#44; Francia&#44; Alemania&#44; Jap&#243;n y Nueva Zelanda&#44; as&#237; como en otro centros de Estados Unidos<span class="elsevierStyleSup">9-13</span>&#46; No obstante&#44; dos tipos de preparados con eritromicina son cl&#237;nicamente efectivos en pacientes con <span class="elsevierStyleItalic"> Propionibacterium acnes</span> resistentes&#44; e incluso reducen el n&#250;mero de organismos resistentes en la superficie cut&#225;nea<span class="elsevierStyleSup">14&#44; 15</span>&#46; Ambos preparados contienen dentro de la f&#243;rmula un segundo principio activo&#44; el acetato de zinc o el per&#243;xido de benzoilo que inhibir&#237;an<span class="elsevierStyleItalic">in vitro</span> los <span class="elsevierStyleItalic">Propionibacterium acnes</span> resistentes a la eritromicina<span class="elsevierStyleSup">16</span>&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Los retinoides t&#243;picos son igualmente activos frente a cepas resistentes y sensibles de <span class="elsevierStyleItalic">Propionibacterium acnes</span><span class="elsevierStyleSup">2</span>&#46; La isotretino&#237;na tambi&#233;n reduce considerablemente el n&#250;mero de <span class="elsevierStyleItalic">Propionibacterium acnes</span> resistentes en la piel de todos los pacientes<span class="elsevierStyleSup">3</span>&#46;</p><p class="elsevierStylePara">El objetivo de nuestro estudio es&#58; a&#41; comprobar el grado de utilizaci&#243;n de antibi&#243;ticos t&#243;picos y sist&#233;micos por una poblaci&#243;n malague&#241;a con acn&#233;&#59; b&#41; cuantificar la tasa de resistencia del <span class="elsevierStyleItalic">Propionibacterium acnes</span> a cada antibi&#243;tico usado&#44; y c&#41; establecer comparaci&#243;n entre las tasas de resistencia de los distintos antibi&#243;ticos usados&#46;</p><p class="elsevierStylePara">PACIENTES&#44; MATERIAL Y M&#201;TODOS</p><p class="elsevierStylePara">Se seleccionaron los 100 primeros pacientes consecutivos vistos en una consulta privada de un m&#233;dico especialista en Dermatolog&#237;a&#46; Todos ellos hab&#237;an sido diagnosticados en los &#250;ltimos 5 a&#241;os de acn&#233; vulgar&#46; Se citaron en dicha consulta en el mes de septiembre de 1999 explic&#225;ndoles el motivo&#46; De los 100 pacientes seleccionados&#44; 7 no acudieron a la cita&#46; Efectuamos una recogida de muestra en esos 93 pacientes con acn&#233; vulgar leve o moderado durante 1999&#46; La toma fue realizada en pacientes de la provincia de M&#225;laga y procesada en el laboratorio de la Universidad de Leeds &#40;Reino Unido&#41;&#44; con posterior cultivo en medios seleccionados para el <span class="elsevierStyleItalic">Propionibacterium acnes</span>&#46; La toma de muestra y cultivo de nuestro trabajo fue realizada con el sistema utilizado rutinariamente en la cl&#237;nica de acn&#233; del <span class="elsevierStyleItalic">Skin Research Centre de Leeds</span><span class="elsevierStyleSup">17</span>&#46; Puesto que se quiso contar con la experiencia del Departamento de Microbiolog&#237;a de la Universidad de Leeds&#44; se seleccion&#243; un medio de transporte contrastado para el env&#237;o de muestras desde M&#225;laga&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Se utiliz&#243; la clasificaci&#243;n cl&#237;nica habitualmente usada en Espa&#241;a&#44; que divide el acn&#233; vulgar en cuatro grados o estadios<span class="elsevierStyleSup">18</span>&#46; Posteriormente se descartaron del estudio 5 pacientes con acn&#233; cuyo cultivo apareci&#243; contaminado por bacterias gramnegativas y&#47;o levaduras&#44; con lo que para el estudio se continu&#243; con 88 pacientes&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Se realiz&#243; adem&#225;s una toma de muestra a 18 familiares de los pacientes con acn&#233; &#40;padres&#44; hermanos o hijos&#41;&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Se recogieron los siguientes datos de los pacientes&#58; edad&#44; sexo&#44; tiempo de evoluci&#243;n desde el inicio del acn&#233;&#44; grado de acn&#233; en el momento de la toma de la muestra&#44; terap&#233;utica t&#243;pica o sist&#233;mica usada en el momento del estudio o previamente&#44; incluidos los diferentes antibi&#243;ticos locales o sist&#233;micos utilizados en el momento del estudio o con anterioridad a la toma de muestra&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Toma de muestra&#44; cultivo e identificaci&#243;n del <span class="elsevierStyleItalic"> Propionibacterium acnes</span></p><p class="elsevierStylePara">La toma de muestra se realiz&#243; en la consulta con un escobill&#243;n est&#233;ril&#44; previamente sumergido en un l&#237;quido preparado &#40;&#171;soluci&#243;n de lavado&#187;&#41;&#44; consistente en la mezcla de 0&#44;075 M de sodio fosfato monob&#225;sico dihidrato y sodio fosfato dib&#225;sico&#44; obteniendo una soluci&#243;n de pH 7&#44;9 y a la que a&#241;adimos 0&#44;1&#37; Triton X-100 como conservante<span class="elsevierStyleSup">5</span>&#46; Dicha mezcla da una soluci&#243;n tamp&#243;n que respeta el equilibrio h&#237;drico de la bacteria sin el cual no ser&#237;a posible su cultivo adecuado&#46; La torunda del escobill&#243;n se pas&#243; con firmeza&#44; de forma que se arqueara el hisopo del escobill&#243;n&#44; y con movimientos desde arriba hacia abajo por las mejillas&#44; la frente y la nariz y de izquierda a derecha en la barbilla y el bigote&#46; Mientras se tomaba la muestra se iba dando vueltas a la torunda de algod&#243;n&#44; de forma que se le adhirieran las bacterias de forma homog&#233;nea&#46; A continuaci&#243;n se introdujo el escobill&#243;n en un medio de transporte apto para anaerobios &#40;medio AMIES&#41; hasta que se realiz&#243; la siembra en un plazo inferior a 24 horas en el laboratorio&#46; Una vez en el laboratorio se procedi&#243; a la inoculaci&#243;n en placas de Agar preparadas con el medio TYG&#44; medio muy espec&#237;fico para el crecimiento del <span class="elsevierStyleItalic">Propionibacterium acnes</span> compuesto por 20 g de peptona tr&#237;psica de case&#237;na&#44; 10 g de extracto de levadura&#44; 10 g de Agar y 5 g de glucosa disueltos en 1 litro de agua destilada&#46; A estas placas se les a&#241;adieron por separado los antibi&#243;ticos adecuados &#40;eritromicina&#44; clindamicina&#44; tetraciclina y minociclina&#41;&#59; en todas las placas se agreg&#243; furazolidona para inhibir el crecimiento de estafilococos &#40;tabla 1&#41;&#46; Despu&#233;s de 7 d&#237;as de incubar en condiciones anaerobias a 37&#186; C&#44; las placas se inspeccionaron para ver el crecimiento&#44; que se gradu&#243; en una escala de 0 a 3 &#43; &#40;0&#58; ning&#250;n crecimiento&#59; 1&#58; crecimiento bajo &#91;1 a 50 colonias&#93;&#59; 2&#58; crecimiento intermedio &#91;51 a 200 colonias&#93;&#59; 3&#58; crecimiento alto &#91;a partir de 200 colonias&#93;&#46; La equivalencia en t&#233;rminos de resistencia fue interpretada como&#58; 0&#58; no hay resistencia&#59; 1&#58; bajo grado de resistencia&#59; 2&#58; resistencia intermedia&#59; 3&#58; alta resistencia&#46; La identificaci&#243;n del <span class="elsevierStyleItalic"> Propionibacterium acnes</span> se bas&#243; en la presencia de colonias con el caracter&#237;stico color crema&#47;rosa y un olor como a &#171;huevos podridos&#187;&#44; apoy&#225;ndose el diagn&#243;stico en el microscopio &#243;ptico que mostr&#243; la t&#237;pica presencia de bacilos curvados grampositivos<span class="elsevierStyleSup">17</span>&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><img src="103v93n04-13031286tab01.gif"></img></p><p class="elsevierStylePara"> RESULTADOS</p><p class="elsevierStylePara">Fueron estudiados 88 pacientes de los que 66 &#40;75&#37;&#41; eran mujeres y 22 &#40;25&#37;&#41; hombres&#46; La edad media fue de 22&#44;25 a&#241;os&#44; con edades comprendidas entre los 13 y los 35 a&#241;os&#44; siendo la edad m&#225;s frecuente los 19 a&#241;os&#46; En m&#225;s de la mitad de los casos &#40;57&#37;&#41; el acn&#233; se hab&#237;a iniciado al menos 5 a&#241;os antes&#46; El grado de acn&#233; predominante fue el II &#40;p&#225;pulo-pustuloso&#41; en 57 pacientes &#40;64&#44;8&#37;&#41;&#59; 17 pacientes &#40;19&#44;3&#37;&#41; tuvieron un grado I&#44; 5 pacientes &#40;5&#44;7&#37;&#41; un grado III y 9 pacientes &#40;10&#44;2&#37;&#41; estaban libres de acn&#233; en el momento de la toma de la muestra&#46; No se estudi&#243; ning&#250;n paciente con un acn&#233; grado IV&#46;</p><p class="elsevierStylePara">En el momento del estudio&#44; 44 pacientes &#40;50&#37;&#41; estaban siendo tratados con terapia combinada t&#243;pica y sist&#233;mica&#44; 37 &#40;42&#37;&#41; s&#243;lo con tratamientos t&#243;picos y 7 &#40;8&#37;&#41; no ten&#237;an ning&#250;n tratamiento en el momento de la toma&#46; Ning&#250;n paciente se encontraba exclusivamente con tratamiento sist&#233;mico&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Dentro de los tratamientos t&#243;picos usados tanto previamente como en el momento del estudio&#44; el grupo hallado con mayor frecuencia &#40;20&#37;&#41; fue el de los que utilizaron eritromicina t&#243;pica&#44; exfoliantes &#40;&#225;cido retinoico&#44; &#225;cido glic&#243;lico y&#47;o &#225;cido salic&#237;lico&#41; y un gel asociando eritromicina &#40;3&#37;&#41; m&#225;s per&#243;xido de benzoilo &#40;5&#37;&#41;&#46; La eritromicina sola o asociada la hab&#237;an usado 85 pacientes &#40;97&#44;5&#37;&#41;&#46; La clindamicina fue usada por 18 pacientes &#40;20&#44;4&#37;&#41; en combinaci&#243;n con otros tratamientos t&#243;picos&#46; Ning&#250;n paciente la hab&#237;a usado sola&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Dentro de los tratamientos antibi&#243;ticos sist&#233;micos&#44; 46 pacientes &#40;52&#37;&#41; usaron la minociclina sola o asociada en alg&#250;n momento&#46; De ellos&#44; 18 pacientes usaron exclusivamente la minociclina como tratamiento oral y 28 asociada a otros tratamientos&#46; La doxicilina fue utilizada por 27 pacientes &#40;10 de manera exclusiva y 17 asociada a otros tratamientos&#41;&#46; Ning&#250;n paciente hab&#237;a utilizado eritromicina oral&#46; La tetraciclina fue usada por 24 pacientes &#40;2 de una manera exclusiva y 22 asociada a otros tratamientos&#41;&#46;</p><p class="elsevierStylePara">En cuanto a los antibi&#243;ticos usados&#44; y con independencia de si lo eran de forma t&#243;pica o sist&#233;mica&#44; con car&#225;cter previo o en el momento de la consulta el antibi&#243;tico m&#225;s usado fue la eritromicina &#40;85 pacientes&#59; 70 en combinaci&#243;n con otros antibi&#243;ticos y 15 sola&#41;&#46; La minociclina la usaron 46 pacientes &#40;45 de forma combinada y 1 sola&#41;&#59; combinaban eritromicina y minociclina&#44; 19 pacientes &#40;22&#37;&#41;&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Los resultados de los cultivos de las tomas de los 88 pacientes queda reflejado en la figura 1&#46; El crecimiento de <span class="elsevierStyleItalic">Propionibacterium acne</span> &#40;sin a&#241;adirle ning&#250;n antibi&#243;tico espec&#237;fico al medio de cultivo a excepci&#243;n de la furazolidona&#41; fue alto &#40;3&#43;&#41; en el 56&#44;8&#37; de los casos&#46; En un 17&#37; el crecimiento fue bajo &#40;1 &#43;&#41; y el 14&#44;8&#37; tuvo crecimiento intermedio &#40;2&#43;&#41;&#59; en el 11&#44;4&#37; no creci&#243; nada &#40;0&#43;&#41;&#46; En las placas en que a&#241;adimos eritromicina&#44; el grupo m&#225;s numeroso fue el de alta resistencia &#40;3&#43;&#41; del <span class="elsevierStyleItalic">Propionibacterium acnes</span> al antibi&#243;tico &#40;36&#44;4&#37;&#41;&#44; el 25&#37; tuvo un crecimiento bajo &#40;1&#43;&#41;&#44; el 19&#44;3&#37; un crecimiento intermedio &#40;2&#43;&#41; y el 19&#44;3&#37; no tuvo ning&#250;n crecimiento &#40;0&#43;&#41;&#46; En aquellas placas en las cuales se a&#241;adi&#243; clindamicina&#44; el grupo m&#225;s numeroso &#40;36&#44;4&#37;&#41; tuvo un crecimiento alto del germen &#40;3&#43;&#41;&#44; el 29&#44;5&#37; un crecimiento bajo &#40;1&#43;&#41;&#44; el 15&#44;4&#37; un crecimiento intermedio &#40;2&#43;&#41; y el 18&#44;2&#37; no tuvieron ning&#250;n crecimiento &#40;0&#43;&#41;&#46; En las placas con tetraciclina como antibi&#243;tico&#44; en la mayor&#237;a &#40;95&#44;5&#37;&#41; no creci&#243; <span class="elsevierStyleItalic">Propionibacterium acnes</span> &#40;0&#43;&#41; y s&#243;lo en 4 pacientes &#40;4&#44;5&#37;&#41; hubo un crecimiento alto &#40;3&#43;&#41;&#46; En el cultivo en el que utilizamos la minociclina llam&#243; la atenci&#243;n que en 86 pacientes &#40;97&#44;7&#37;&#41; no creci&#243; nada &#40;0&#43;&#41;&#44; mientras que en s&#243;lo 2 pacientes &#40;2&#44;3&#37;&#41; hubo un crecimiento alto &#40;3&#43;&#41;&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><img src="103v93n04-13031286tab02.gif"></img></p><p class="elsevierStylePara">FIG&#46; 1&#46;--Resultados del cultivo &#40;&#37;&#41; del <span class="elsevierStyleItalic">Propionibacterium acnes</span> en los distintos medios de cultivo&#46;</p><p class="elsevierStylePara">En las muestras de los 18 contactos familiares de nuestros pacientes de acn&#233; &#40;padres&#44; hermanos o hijos&#41; hubo un crecimiento alto de <span class="elsevierStyleItalic">Propionibacterium acnes</span>&#44; sin a&#241;adir antibi&#243;ticos espec&#237;ficos en 12 &#40;66&#44;7&#37;&#41;&#59; en 5 &#40;27&#44;8&#37;&#41; los cultivos con eritromicina dieron un crecimiento alto del germen y en 7 &#40;38&#44;9&#37;&#41; la clindamicina&#46; Por el contrario&#44; la tetraciclina nos dio un 94&#44;4&#37; de sensibilidad y la minociclina un 100&#37;&#46; Aunque evidentemente este grupo de contactos control es una muestra peque&#241;a&#44; los datos obtenidos pueden ser orientativos&#46;</p><p class="elsevierStylePara"> DISCUSI&#211;N</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleItalic"> Propionibacterium acnes</span> es un factor m&#225;s a tener en cuenta dentro de la etiopatogenia del acn&#233; y el hecho de encontrar este microorganismo resistente o sensible a los distintos antibi&#243;ticos&#44; como hemos presentado en nuestro trabajo&#44; no implica necesariamente el &#233;xito o fracaso en el tratamiento &#44; ya que este microorganismo tambi&#233;n se encuentra en la piel de sujetos sanos<span class="elsevierStyleSup">1</span>&#46;</p><p class="elsevierStylePara">En un estudio realizado en Leeds se observ&#243; que uno de cada dos contactos m&#225;s cercanos presentaba cepas resistentes<span class="elsevierStyleSup">5</span>&#46; Esto nos deja una puerta abierta para investigar los contactos m&#225;s &#237;ntimos en pacientes con acn&#233;&#44; con una muestra m&#225;s amplia y poder corroborar la transferencia de cepas resistentes a antibi&#243;ticos de personas afectadas con acn&#233; a aquellas que no lo tienen&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Los datos presentados en el estudio confirman&#44; tal y como recoge la literatura&#44; un predominio de acn&#233; en el sexo femenino y una edad media en torno a los 22 a&#241;os&#44; observ&#225;ndose el incremento del acn&#233; en mujeres mayores de 20 a&#241;os<span class="elsevierStyleSup">19&#44; 20</span>&#46; El hecho de que en m&#225;s de la mitad de los casos &#40;57&#37;&#41; el acn&#233; se iniciara 5 a&#241;os antes de comenzar el estudio&#44; nos puede indicar que los tratamientos utilizados&#44; y en nuestro caso los antibi&#243;ticos t&#243;picos y&#47;o sist&#233;micos&#44; han sido usados durante largos per&#237;odos y por ende pueden haber contribuido a la formaci&#243;n de cepas resistentes de <span class="elsevierStyleItalic">Propionibacterium acnes&#46;</span></p><p class="elsevierStylePara">Es interesante subrayar que la mayor parte de los pacientes estudiados fueron del grado II&#44; no pudiendo haber sido afectada la muestra por valores extremos &#40;en la muestra no se recogi&#243; ning&#250;n caso de acn&#233; grado IV ni de acn&#233; noduloqu&#237;stico&#41;&#46; El hecho de que el antibi&#243;tico m&#225;s usado en nuestro estudio&#44; con un 97&#44;5&#37;&#44; fuera la eritromicina puede hacernos pensar que realmente es el antibi&#243;tico m&#225;s ampliamente utilizado en el acn&#233; por la poblaci&#243;n general&#44; y esto se puede constatar por la historia cl&#237;nica de nuestros pacientes&#44; donde no solamente el m&#233;dico de cabecera lo utiliza habitualmente&#44; sino que el farmac&#233;utico e incluso el propio paciente se lo automedica&#46; Este uso continuado de la eritromicina podr&#237;a ser un factor predisponente para el desarrollo de cepas resistentes de <span class="elsevierStyleItalic">Propionibacterium acnes</span><span class="elsevierStyleItalic"><span class="elsevierStyleSup">5</span></span>&#46; En nuestro estudio se observ&#243; una resistencia alta del <span class="elsevierStyleItalic">Propionibacterium acnes</span><span class="elsevierStyleSup">5</span> frente a la eritromicina en el 36&#44;5&#37; de los cultivos y una resistencia intermedia en el 19&#44;3&#37;&#59; es decir&#44; que en un 55&#44;8&#37; de los casos crecieron m&#225;s de 51 colonias de <span class="elsevierStyleItalic">Propionibacterium acnes</span> en los cultivos con eritromicina&#46; Esto coincide con la literatura&#44; donde la eritromicina fue el antibi&#243;tico que cre&#243; m&#225;s resistencia<span class="elsevierStyleSup">3&#44; 5</span>&#46; La clindamicina t&#243;pica es otro antibi&#243;tico ampliamente utilizado en el acn&#233; desde hace a&#241;os&#46; Nuestro trabajo muestra que en un 51&#44;8&#37; de los cultivos con ese antibi&#243;tico crecieron m&#225;s de 51 colonias&#44; lo que significa que&#44; si bien globalmente la eritromicina fue el antibi&#243;tico m&#225;s resistente &#44; la diferencia respecto a la clindamicina fue peque&#241;a&#46;</p><p class="elsevierStylePara">El grado de resistencia del <span class="elsevierStyleItalic">Propionibacterium acnes</span> obtenido en nuestro trabajo es mayor con las tetraciclinas cl&#225;sicas que con la minociclina<span class="elsevierStyleSup">2</span>&#46; El hecho de que en el 95&#44;5&#37; de los casos no hubiera ning&#250;n tipo de crecimiento bacteriano en los cultivos con tetraciclina puede hacernos pensar que la resistencia a las tetraciclinas es bastante baja&#44; a pesar de ser uno de los primeros antibi&#243;ticos usados para el tratamiento del acn&#233; y que es considerada a&#250;n como un tratamiento de primera elecci&#243;n<span class="elsevierStyleSup">21</span>&#46; Sin embargo&#44; en el Reino Unido y en Estados Unidos se est&#225;n detectando cada vez m&#225;s cepas de  <span class="elsevierStyleItalic">Propionibacterium acnes</span> resistentes a diferentes tipos de tetraciclinas&#44; adem&#225;s de a la eritromicina y a la clindamicina&#44; reduci&#233;ndose de este modo el n&#250;mero de opciones terap&#233;uticas<span class="elsevierStyleSup">2</span>&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Diferentes art&#237;culos son un&#225;nimes a la hora de catalogar la resistencia a la minociclina como extremadamente rara&#44; lo que concuerda con nuestros resultados&#44; donde un 97&#44;7&#37; de los cultivos con ese antibi&#243;tico fueron sensibles al mismo&#44; siendo&#44; por tanto&#44; el antibi&#243;tico de elecci&#243;n dentro de las diferentes modalidades de tratamiento antibi&#243;ticas<span class="elsevierStyleSup">22-25</span>&#46; Sin embargo&#44; conviene recordar que la resistencia a la minociclina a veces no es fiable&#44; ya que es un antibi&#243;tico muy inestable en Agar a 34&#186; C<span class="elsevierStyleSup">5</span>&#46; Esto nos orientar&#225; en el futuro hacia la utilizaci&#243;n de nuevos antibi&#243;ticos<span class="elsevierStyleSup">26-28</span> para evitar la creaci&#243;n de futuras resistencias&#46;</p><p class="elsevierStylePara"> AGRADECIMIENTOS</p><p class="elsevierStylePara">Nuestro agradecimiento al Departamento de Microbiolog&#237;a del laboratorio de la Universidad de Leeds&#44; en especial a Trish Coates y Anne Eady por su colaboraci&#243;n en la realizaci&#243;n de este trabajo&#46;</p>"
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Vol. 93. Núm. 4.
Páginas 271-275 (abril 2002)
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Resistencia antibiótica del Propionibacterium acnes en pacientes tratados por acné vulgar en Málaga
Antibiotic resistance of Propionibacterium acnes in patients with acne vulgaris treated in Malaga
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José Ignacio Galvañ Pérez del Pulgara, Rocío Fernández Nebredab, José María Laza Garcíac, William James Cunliffed
a Clínica Privada de Dermatología. Hospital Clínico Universitario.
b Departamento de Medicina Preventiva. Hospital Clínico Universitario.
c Laboratorio de Análisis y Microbiología Laza. Málaga.
d Departamento de Dermatología del Skin Research Centre. Leeds. Reino Unido.
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FIG. 1. --Resultados del cultivo (%) del Propionibacterium acnes en los distintos medios de cultivo.
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Introducción: el acné vulgar es una enfermedad multifactorial del folículo polisebáceo, en cuya patogenia parece que desempeña un papel importante el Propionibacterium acnes. Los objetivos de este estudio fueron: a) comprobar el grado de uso de antibióticos tópicos y sistémicos en la población malagueña; b) cuantificar la tasa de resistencia de P. acnes a cada antibiótico usado, y c) hacer una comparación entre esas tasas de resistencia. Pacientes y método: en 1999 se tomaron muestras bacteriológicas de la superficie de la cara de 88 pacientes consecutivos con acné vistos en una consulta privada. El sistema utilizado fue el rutinario en la clínica de acné de la Universidad de Leeds (Reino Unido). Resultados: la mitad de los pacientes habían recibido tratamiento tópico y sistémico para su acné. Casi la totalidad (97,5%) habían usado eritromicina tópica y el 20,4% clidamicina tópica. La minociclina fue el antibiótico sistémico de elección (52%). La eritromicina fue el antibiótico frente al cual se apreció una mayor tasa de resistencia en los cultivos de P. acnes (55,8%) seguida de la clindamicina (51,8%). Propionibacterium acnes fue sensible a minociclina en el 97,7% de los cultivos y a tetraciclina en el 95,5%. Conclusiones: los antibióticos tópicos más utilizados fueron los que presentaron mayor tasa de resistencias, mientras que hubo escasas resistencias frente a los antibióticos utilizados de modo sistémico.
Palabras clave:
antibióticos, acné vulgar, Propionibacterium acnes, tetraciclina, eritromicina, clindamicina, resistencia bacteriana a antibióticos
Introduction: acne vulgaris is a multifactorial disease of the pilosebaceous follicle inwhich Propionibacteria acnes are thought to play an important role in the pathogenesis. The aim of this study was: a) to document the use of topical and systemic antibiotics amongst the population of acne sufferers in Malaga; b) to quantify the number of Propionibacterium acnes resistant strains for each antibiotic, and c) to compare the level of resistance of these strains to the antibiotics used. Patients and method: in 1999 samples were taken from the surface of the facial skin of 88 consecutive patients in the private practice. The system used was that routinely followed at the acne clinic at Leeds University, England. Results: half of the patients studied had received treatment for acne along with topical and systemic treatment. Almost all patients studied (97.5%) used topical erythromycin; topical clyndamycin was used by 20.4%. Minocicline was the systemic antibiotic most opted for (52%). Erythromycin was the antibiotic with the most resistant strains (55.8%) followed by clindamycine (51.8%). Propionibacterium acnes was sensitive to minocicline in 97.7% of the cultures and tetracycline in 95.5% of them. Conclusions: the topical antibiotics used were those which presented the highest percentage of resistence whereas the systemic antibiotics used with on patients showed high sensitivity indices.
Keywords:
antibiotics, acne vulgaris, Propionibacterium acnes, tetracycline, erytromycin, clindamycin, antibiotic resistance
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INTRODUCCIÓN

El acné vulgar es una enfermedad multifactorial del folículo pilosebáceo, en cuya patogenia se piensa que desempeña un papel importante el Propionibacterium acnes1. La mayoría de los expertos aceptan actualmente que el Propionibacterium acnes no inicia dicha patología, pero contribuye a desencadenar el proceso inflamatorio que en ella se produce2.

Los tratamientos usados en el acné que interfieren en el crecimiento y/o en el metabolismo del Propionibacterium acnes se pueden dividir en antibióticos y antimicrobianos no antibióticos3. El mecanismo de acción de los antibióticos tópicos no está aclarado suficientemente; posiblemente actúen inhibiendo el crecimiento del Propionibacterium acnes y mediante un efecto antiinflamatorio directo4.

Los pacientes con acné son un reservorio considerable de cepas resistentes que pueden ser transferidas a contactos cercanos no afectados de acné5. La rápida inducción de resistencia a antibióticos del Propionibacterium acnes, acompañada de brotes de acné, ha sido descrita tras la aplicación de eritromicina y clindamicina tópicas, así como después de utilizar tetra-ciclina, eritromicina y doxiciclina sistémicas6, 7.

Los Propionibacterium acnes resistentes a la eritromicina y clindamicina fueron detectados por primera vez al final de los años setenta en Estados Unidos8. Desde entonces se han detectado en el Reino Unido, Francia, Alemania, Japón y Nueva Zelanda, así como en otro centros de Estados Unidos9-13. No obstante, dos tipos de preparados con eritromicina son clínicamente efectivos en pacientes con Propionibacterium acnes resistentes, e incluso reducen el número de organismos resistentes en la superficie cutánea14, 15. Ambos preparados contienen dentro de la fórmula un segundo principio activo, el acetato de zinc o el peróxido de benzoilo que inhibiríanin vitro los Propionibacterium acnes resistentes a la eritromicina16.

Los retinoides tópicos son igualmente activos frente a cepas resistentes y sensibles de Propionibacterium acnes2. La isotretinoína también reduce considerablemente el número de Propionibacterium acnes resistentes en la piel de todos los pacientes3.

El objetivo de nuestro estudio es: a) comprobar el grado de utilización de antibióticos tópicos y sistémicos por una población malagueña con acné; b) cuantificar la tasa de resistencia del Propionibacterium acnes a cada antibiótico usado, y c) establecer comparación entre las tasas de resistencia de los distintos antibióticos usados.

PACIENTES, MATERIAL Y MÉTODOS

Se seleccionaron los 100 primeros pacientes consecutivos vistos en una consulta privada de un médico especialista en Dermatología. Todos ellos habían sido diagnosticados en los últimos 5 años de acné vulgar. Se citaron en dicha consulta en el mes de septiembre de 1999 explicándoles el motivo. De los 100 pacientes seleccionados, 7 no acudieron a la cita. Efectuamos una recogida de muestra en esos 93 pacientes con acné vulgar leve o moderado durante 1999. La toma fue realizada en pacientes de la provincia de Málaga y procesada en el laboratorio de la Universidad de Leeds (Reino Unido), con posterior cultivo en medios seleccionados para el Propionibacterium acnes. La toma de muestra y cultivo de nuestro trabajo fue realizada con el sistema utilizado rutinariamente en la clínica de acné del Skin Research Centre de Leeds17. Puesto que se quiso contar con la experiencia del Departamento de Microbiología de la Universidad de Leeds, se seleccionó un medio de transporte contrastado para el envío de muestras desde Málaga.

Se utilizó la clasificación clínica habitualmente usada en España, que divide el acné vulgar en cuatro grados o estadios18. Posteriormente se descartaron del estudio 5 pacientes con acné cuyo cultivo apareció contaminado por bacterias gramnegativas y/o levaduras, con lo que para el estudio se continuó con 88 pacientes.

Se realizó además una toma de muestra a 18 familiares de los pacientes con acné (padres, hermanos o hijos).

Se recogieron los siguientes datos de los pacientes: edad, sexo, tiempo de evolución desde el inicio del acné, grado de acné en el momento de la toma de la muestra, terapéutica tópica o sistémica usada en el momento del estudio o previamente, incluidos los diferentes antibióticos locales o sistémicos utilizados en el momento del estudio o con anterioridad a la toma de muestra.

Toma de muestra, cultivo e identificación del Propionibacterium acnes

La toma de muestra se realizó en la consulta con un escobillón estéril, previamente sumergido en un líquido preparado («solución de lavado»), consistente en la mezcla de 0,075 M de sodio fosfato monobásico dihidrato y sodio fosfato dibásico, obteniendo una solución de pH 7,9 y a la que añadimos 0,1% Triton X-100 como conservante5. Dicha mezcla da una solución tampón que respeta el equilibrio hídrico de la bacteria sin el cual no sería posible su cultivo adecuado. La torunda del escobillón se pasó con firmeza, de forma que se arqueara el hisopo del escobillón, y con movimientos desde arriba hacia abajo por las mejillas, la frente y la nariz y de izquierda a derecha en la barbilla y el bigote. Mientras se tomaba la muestra se iba dando vueltas a la torunda de algodón, de forma que se le adhirieran las bacterias de forma homogénea. A continuación se introdujo el escobillón en un medio de transporte apto para anaerobios (medio AMIES) hasta que se realizó la siembra en un plazo inferior a 24 horas en el laboratorio. Una vez en el laboratorio se procedió a la inoculación en placas de Agar preparadas con el medio TYG, medio muy específico para el crecimiento del Propionibacterium acnes compuesto por 20 g de peptona trípsica de caseína, 10 g de extracto de levadura, 10 g de Agar y 5 g de glucosa disueltos en 1 litro de agua destilada. A estas placas se les añadieron por separado los antibióticos adecuados (eritromicina, clindamicina, tetraciclina y minociclina); en todas las placas se agregó furazolidona para inhibir el crecimiento de estafilococos (tabla 1). Después de 7 días de incubar en condiciones anaerobias a 37º C, las placas se inspeccionaron para ver el crecimiento, que se graduó en una escala de 0 a 3 + (0: ningún crecimiento; 1: crecimiento bajo [1 a 50 colonias]; 2: crecimiento intermedio [51 a 200 colonias]; 3: crecimiento alto [a partir de 200 colonias]. La equivalencia en términos de resistencia fue interpretada como: 0: no hay resistencia; 1: bajo grado de resistencia; 2: resistencia intermedia; 3: alta resistencia. La identificación del Propionibacterium acnes se basó en la presencia de colonias con el característico color crema/rosa y un olor como a «huevos podridos», apoyándose el diagnóstico en el microscopio óptico que mostró la típica presencia de bacilos curvados grampositivos17.

RESULTADOS

Fueron estudiados 88 pacientes de los que 66 (75%) eran mujeres y 22 (25%) hombres. La edad media fue de 22,25 años, con edades comprendidas entre los 13 y los 35 años, siendo la edad más frecuente los 19 años. En más de la mitad de los casos (57%) el acné se había iniciado al menos 5 años antes. El grado de acné predominante fue el II (pápulo-pustuloso) en 57 pacientes (64,8%); 17 pacientes (19,3%) tuvieron un grado I, 5 pacientes (5,7%) un grado III y 9 pacientes (10,2%) estaban libres de acné en el momento de la toma de la muestra. No se estudió ningún paciente con un acné grado IV.

En el momento del estudio, 44 pacientes (50%) estaban siendo tratados con terapia combinada tópica y sistémica, 37 (42%) sólo con tratamientos tópicos y 7 (8%) no tenían ningún tratamiento en el momento de la toma. Ningún paciente se encontraba exclusivamente con tratamiento sistémico.

Dentro de los tratamientos tópicos usados tanto previamente como en el momento del estudio, el grupo hallado con mayor frecuencia (20%) fue el de los que utilizaron eritromicina tópica, exfoliantes (ácido retinoico, ácido glicólico y/o ácido salicílico) y un gel asociando eritromicina (3%) más peróxido de benzoilo (5%). La eritromicina sola o asociada la habían usado 85 pacientes (97,5%). La clindamicina fue usada por 18 pacientes (20,4%) en combinación con otros tratamientos tópicos. Ningún paciente la había usado sola.

Dentro de los tratamientos antibióticos sistémicos, 46 pacientes (52%) usaron la minociclina sola o asociada en algún momento. De ellos, 18 pacientes usaron exclusivamente la minociclina como tratamiento oral y 28 asociada a otros tratamientos. La doxicilina fue utilizada por 27 pacientes (10 de manera exclusiva y 17 asociada a otros tratamientos). Ningún paciente había utilizado eritromicina oral. La tetraciclina fue usada por 24 pacientes (2 de una manera exclusiva y 22 asociada a otros tratamientos).

En cuanto a los antibióticos usados, y con independencia de si lo eran de forma tópica o sistémica, con carácter previo o en el momento de la consulta el antibiótico más usado fue la eritromicina (85 pacientes; 70 en combinación con otros antibióticos y 15 sola). La minociclina la usaron 46 pacientes (45 de forma combinada y 1 sola); combinaban eritromicina y minociclina, 19 pacientes (22%).

Los resultados de los cultivos de las tomas de los 88 pacientes queda reflejado en la figura 1. El crecimiento de Propionibacterium acne (sin añadirle ningún antibiótico específico al medio de cultivo a excepción de la furazolidona) fue alto (3+) en el 56,8% de los casos. En un 17% el crecimiento fue bajo (1 +) y el 14,8% tuvo crecimiento intermedio (2+); en el 11,4% no creció nada (0+). En las placas en que añadimos eritromicina, el grupo más numeroso fue el de alta resistencia (3+) del Propionibacterium acnes al antibiótico (36,4%), el 25% tuvo un crecimiento bajo (1+), el 19,3% un crecimiento intermedio (2+) y el 19,3% no tuvo ningún crecimiento (0+). En aquellas placas en las cuales se añadió clindamicina, el grupo más numeroso (36,4%) tuvo un crecimiento alto del germen (3+), el 29,5% un crecimiento bajo (1+), el 15,4% un crecimiento intermedio (2+) y el 18,2% no tuvieron ningún crecimiento (0+). En las placas con tetraciclina como antibiótico, en la mayoría (95,5%) no creció Propionibacterium acnes (0+) y sólo en 4 pacientes (4,5%) hubo un crecimiento alto (3+). En el cultivo en el que utilizamos la minociclina llamó la atención que en 86 pacientes (97,7%) no creció nada (0+), mientras que en sólo 2 pacientes (2,3%) hubo un crecimiento alto (3+).

FIG. 1.--Resultados del cultivo (%) del Propionibacterium acnes en los distintos medios de cultivo.

En las muestras de los 18 contactos familiares de nuestros pacientes de acné (padres, hermanos o hijos) hubo un crecimiento alto de Propionibacterium acnes, sin añadir antibióticos específicos en 12 (66,7%); en 5 (27,8%) los cultivos con eritromicina dieron un crecimiento alto del germen y en 7 (38,9%) la clindamicina. Por el contrario, la tetraciclina nos dio un 94,4% de sensibilidad y la minociclina un 100%. Aunque evidentemente este grupo de contactos control es una muestra pequeña, los datos obtenidos pueden ser orientativos.

DISCUSIÓN

Propionibacterium acnes es un factor más a tener en cuenta dentro de la etiopatogenia del acné y el hecho de encontrar este microorganismo resistente o sensible a los distintos antibióticos, como hemos presentado en nuestro trabajo, no implica necesariamente el éxito o fracaso en el tratamiento , ya que este microorganismo también se encuentra en la piel de sujetos sanos1.

En un estudio realizado en Leeds se observó que uno de cada dos contactos más cercanos presentaba cepas resistentes5. Esto nos deja una puerta abierta para investigar los contactos más íntimos en pacientes con acné, con una muestra más amplia y poder corroborar la transferencia de cepas resistentes a antibióticos de personas afectadas con acné a aquellas que no lo tienen.

Los datos presentados en el estudio confirman, tal y como recoge la literatura, un predominio de acné en el sexo femenino y una edad media en torno a los 22 años, observándose el incremento del acné en mujeres mayores de 20 años19, 20. El hecho de que en más de la mitad de los casos (57%) el acné se iniciara 5 años antes de comenzar el estudio, nos puede indicar que los tratamientos utilizados, y en nuestro caso los antibióticos tópicos y/o sistémicos, han sido usados durante largos períodos y por ende pueden haber contribuido a la formación de cepas resistentes de Propionibacterium acnes.

Es interesante subrayar que la mayor parte de los pacientes estudiados fueron del grado II, no pudiendo haber sido afectada la muestra por valores extremos (en la muestra no se recogió ningún caso de acné grado IV ni de acné noduloquístico). El hecho de que el antibiótico más usado en nuestro estudio, con un 97,5%, fuera la eritromicina puede hacernos pensar que realmente es el antibiótico más ampliamente utilizado en el acné por la población general, y esto se puede constatar por la historia clínica de nuestros pacientes, donde no solamente el médico de cabecera lo utiliza habitualmente, sino que el farmacéutico e incluso el propio paciente se lo automedica. Este uso continuado de la eritromicina podría ser un factor predisponente para el desarrollo de cepas resistentes de Propionibacterium acnes5. En nuestro estudio se observó una resistencia alta del Propionibacterium acnes5 frente a la eritromicina en el 36,5% de los cultivos y una resistencia intermedia en el 19,3%; es decir, que en un 55,8% de los casos crecieron más de 51 colonias de Propionibacterium acnes en los cultivos con eritromicina. Esto coincide con la literatura, donde la eritromicina fue el antibiótico que creó más resistencia3, 5. La clindamicina tópica es otro antibiótico ampliamente utilizado en el acné desde hace años. Nuestro trabajo muestra que en un 51,8% de los cultivos con ese antibiótico crecieron más de 51 colonias, lo que significa que, si bien globalmente la eritromicina fue el antibiótico más resistente , la diferencia respecto a la clindamicina fue pequeña.

El grado de resistencia del Propionibacterium acnes obtenido en nuestro trabajo es mayor con las tetraciclinas clásicas que con la minociclina2. El hecho de que en el 95,5% de los casos no hubiera ningún tipo de crecimiento bacteriano en los cultivos con tetraciclina puede hacernos pensar que la resistencia a las tetraciclinas es bastante baja, a pesar de ser uno de los primeros antibióticos usados para el tratamiento del acné y que es considerada aún como un tratamiento de primera elección21. Sin embargo, en el Reino Unido y en Estados Unidos se están detectando cada vez más cepas de Propionibacterium acnes resistentes a diferentes tipos de tetraciclinas, además de a la eritromicina y a la clindamicina, reduciéndose de este modo el número de opciones terapéuticas2.

Diferentes artículos son unánimes a la hora de catalogar la resistencia a la minociclina como extremadamente rara, lo que concuerda con nuestros resultados, donde un 97,7% de los cultivos con ese antibiótico fueron sensibles al mismo, siendo, por tanto, el antibiótico de elección dentro de las diferentes modalidades de tratamiento antibióticas22-25. Sin embargo, conviene recordar que la resistencia a la minociclina a veces no es fiable, ya que es un antibiótico muy inestable en Agar a 34º C5. Esto nos orientará en el futuro hacia la utilización de nuevos antibióticos26-28 para evitar la creación de futuras resistencias.

AGRADECIMIENTOS

Nuestro agradecimiento al Departamento de Microbiología del laboratorio de la Universidad de Leeds, en especial a Trish Coates y Anne Eady por su colaboración en la realización de este trabajo.

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