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el virus del papiloma humano</span>9-15&#46; En este trabajo se describen dos pacientes que presentaban cl&#237;nica e histol&#243;gicamente lesiones de LEA en las que se investig&#243; la presencia del virus del papiloma humano &#40;VPH&#41; en la epidermis&#44; hall&#225;ndose positivo en ambos&#46; La presencia de este virus podr&#237;a constituir un factor antig&#233;nico para desarrollar distintos fen&#243;menos inmunol&#243;gicos locales caracter&#237;sticos del LEA y ser un cofactor para desarrollar m&#225;s tard&#237;amente un carcinoma espinocelular&#46;</p><p class="elsevierStylePara">DESCRIPCI&#211;N DE LOS CASOS</p><p class="elsevierStylePara">Cl&#237;nica</p><p class="elsevierStylePara">Caso 1</p><p class="elsevierStylePara">Mujer de 48 a&#241;os que consult&#243; en la Cl&#237;nica Ginecol&#243;gica por ardor y prurito en &#225;reas genitales&#46; En el examen f&#237;sico se observaron lesiones blanquecinas&#44; discretamente atr&#243;ficas&#44; en cara interna de labio mayor&#44; menor y regi&#243;n periuretral y clitoridiana&#46; No hab&#237;a lesiones en vagina&#44; ni en regiones perineal y perianal&#46; Tampoco se hallaban otras manifestaciones cut&#225;neas o sist&#233;micas de inter&#233;s&#46; La paciente ten&#237;a m&#250;ltiples relaciones sexuales con distintas parejas desconocidas&#46; Los an&#225;lisis de laboratorio&#44; incluyendo los de orden inmunol&#243;gico&#44; fueron normales&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Caso 2</p><p class="elsevierStylePara">Mujer de 38 a&#241;os&#44; diab&#233;tica tipo 2&#44; que consult&#243; por intenso prurito en zonas genitales&#44; acompa&#241;ado de dispareumia&#44; desde hac&#237;a 4 a&#241;os&#46; Al examen f&#237;sico se observ&#243; en la cara interna de labios mayores&#44; menores&#44; regi&#243;n del cl&#237;toris y perineal extensas placas blanquecinas&#44; brillantes&#44; de l&#237;mites difusos y muy dolorosas&#46; El examen ginecol&#243;gico demostr&#243; una cervicitis cr&#243;nica&#46; En m&#250;ltiples exudados vaginales se detect&#243; una candidiasis que fue tratada con relativo &#233;xito&#46; La paciente ten&#237;a una &#250;nica pareja sexual sin lesiones cl&#237;nicas en los genitales&#44; aunque nunca realiz&#243; an&#225;lisis espec&#237;ficos para el VPH&#46; Desde el punto de vista sist&#233;mico presentaba un bocio con hipertiroidismo&#46; Los an&#225;lisis de laboratorio fueron normales&#46;</p><p class="elsevierStylePara">La histopatolog&#237;a mostr&#243; en ambos casos lesiones similares de LEA en per&#237;odo de estado con marcada hiperqueratosis ortoquerat&#243;sica&#44; ausencia de granulosa y una epidermis atr&#243;fica&#44; sin crestas y sin degeneraci&#243;n hidr&#243;pica de la basal&#46; Destacamos que en la parte superior de la capa de Malphigi se observaban numerosos coilocitos &#40;fig&#46; 1&#41;&#46; En la dermis papilar y reticular alta las fibras col&#225;genas eran esclerosas&#46; Ausencia de infiltrado inflamatorio&#44; excepto algunos linfocitos de disposici&#243;n perivascular en la dermis reticular&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><img src="103v93n06-13034577fig01.jpg"></img></p><p class="elsevierStylePara">Fig 1&#46;--Histopatolog&#237;a de la epidermis con presencia de coilocitos en los queratinocitos&#46;</p><p class="elsevierStylePara">En el caso 1 se investig&#243; el VPH por el m&#233;todo de fluorescencia indirecta con anticuerpos monoclonales &#40;Biodesign&#44; Maine&#44; USA&#41; sobre c&#233;lulas epiteliales exfoliadas obtenidas por rascado de las lesiones previa asepsia&#46; Dicha prueba se repiti&#243; en tres oportunidades&#46; Las pruebas fueron positivas para el VPH cuando las c&#233;lulas mostraron un patr&#243;n de fluorescencia id&#233;ntico a los obtenidos por controles positivos para este virus&#46; En el caso 2 se realiz&#243; una biopsia por punch&#44; fijaci&#243;n en formol y los cortes se colorearon en l&#225;minas silanizadas para emplear la t&#233;cnica de hidridizaci&#243;n in situ&#46; Esta prueba fue efectuada con fluoresce&#237;na &#40;DAKO&#44; USA&#41; para VPH general&#46; Los cortes fueron desparafinados y pepsinizados durante 15 minutos&#44; luego denaturalizados a 95&#176; C durante 5 minutos&#44; posteriormente se efectu&#243; la hibridizaci&#243;n con HOOPV toda la noche &#40;37&#176; C&#41; y luego lavados con una soluci&#243;n a 48&#176; C durante 30 minutos&#46; Se efectu&#243; la tinci&#243;n con fosfatasa alcalina con anticuerpo anti-fuoresce&#237;na por 1 hora y despu&#233;s con NBT-BCIP por 2 horas&#46; La tinci&#243;n de contraste se realiz&#243; con fast red y observaci&#243;n al microscopio &#243;ptico &#40;fig&#46; 2&#41;&#46; La prueba de fluorescencia indirecta se repiti&#243; a los 12 meses de tratamiento en las dos pacientes con resultados negativos&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><img src="103v93n06-13034577fig02.jpg"></img></p><p class="elsevierStylePara">Fig&#46; 2&#46;--Caso 2&#46; Queratinocitos con presencia del virus del papiloma humano por hidridizaci&#243;n in situ&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Ambas pacientes recibieron tratamiento local con cremas con corticosteroides de tercera generaci&#243;n y retinoides &#40;isotretino&#237;na&#41; por v&#237;a oral a raz&#243;n de tres comprimidos de 20 mg&#47;d y alfa tocoferol 800 mg&#47;d por tiempo prolongado&#44; mejorando muy lentamente&#46; Cuando se le instituy&#243; localmente medicaci&#243;n con imiquimod &#40;1 hora por la noche&#44; en d&#237;as alternos durante 2 semanas&#44; y luego dos veces por semana durante 3 meses&#44; aunque en numerosas ocasiones se interrumpi&#243; dada su intensa acci&#243;n irritante&#41; la mejor&#237;a fue algo m&#225;s r&#225;pida&#44; tanto desde el punto de vista cl&#237;nico&#44; en su prurito que era incoercible&#44; como funcional en sus relaciones sexuales&#46; Es llamativo que despu&#233;s de 1 a&#241;o de tratamiento no se logr&#243; aislar por frotis el VPH&#46;</p><p class="elsevierStylePara">DISCUSI&#211;N</p><p class="elsevierStylePara">El VPH fue detectado por el m&#233;todo de fluorescencia en el caso 1 y por hidridizaci&#243;n in situ en el caso 2&#46; En todos se observ&#243; el virus en los n&#250;cleos de las c&#233;lulas epiteliales&#46; La t&#233;cnica m&#225;s sensible&#44; pero menos espec&#237;fica para afirmar la presencia del virus es la reacci&#243;n en cadena de la polimerasa &#40;PCR&#41;&#46; Con relaci&#243;n a la seguridad de la presencia para el VPH por ambas t&#233;cnicas empleadas en nuestros casos&#44; Zaki et al<span class="elsevierStyleSup">16</span> sostienen que no son de confianza en el sentido de una seguridad absoluta para la presencia del virus&#44; y Jablonska et al<span class="elsevierStyleSup">17</span> agregaron que la hidridizaci&#243;n in situ puede no ser sensible debido al defecto del bajo n&#250;mero de copias del VPH-ADN&#46; Sin embargo&#44; en el caso efectuado por la hidridizaci&#243;n fue muy demostrativa en las c&#233;lulas epiteliales&#44; lo que nos permite afirmar su presencia&#46; En cambio&#44; cuando los resultados son negativos no se descarta la presencia del virus&#46;</p><p class="elsevierStylePara">El LEA es una afecci&#243;n de no muy rara frecuencia&#44; con predomino en &#225;reas genitales&#44; que se caracteriza por lesiones blanquecinas&#44; brillantes&#44; en placas&#44; de l&#237;mites difusos&#44; bilaterales y sim&#233;tricas y de aspecto atr&#243;fico&#46; Son muy pruriginosas y de evoluci&#243;n cr&#243;nica&#46; Se localizan en ambos labios de la vulva&#44; cl&#237;toris&#44; vest&#237;bulo y regiones perineales y perianales&#46; Provocan diversas manifestaciones subjetivas en la esfera genital y urol&#243;gica&#46; La histopatolog&#237;a muestra una hiperqueratosis ortoquerat&#243;sica&#44; asociada a una atrofia del cuerpo mucoso con degeneraci&#243;n hidr&#243;pica de la capa basal en per&#237;odos de actividad&#44; edema en la dermis superior y homogeneizaci&#243;n del col&#225;geno asociada con un proceso inflamatorio a predominio linfocitario&#46; De esta manera se puede clasificar el LEA como una dermatitis de interfase con alteraciones de la epidermis&#44; membrana basal y dermis<span class="elsevierStyleSup">18</span>&#46; La etiopatogenia es desconocida<span class="elsevierStyleSup">1-5</span>&#46; Se trata de un s&#237;ndrome multifactorial que cuando est&#225; localizado en piel y generalizado debe tener una etiolog&#237;a y mecanismos fisiopatol&#243;gicos totalmente diferentes al de localizaci&#243;n genital&#46; Una de sus posibles causas en este &#225;rea puede ser la presencia del VPH<span class="elsevierStyleSup">9-15</span>&#46; En este trabajo se estudiaron dos pacientes con lesiones de LEA vulvar en per&#237;odos de estado despu&#233;s de a&#241;os de evoluci&#243;n&#46; En ambas se encontr&#243; el VPH por dos m&#233;todos de laboratorio diferentes&#46; El hallazgo del virus del papiloma humano en nuestros casos nos plantea varias interrogantes&#58; a&#41; que el virus pueda estar vinculado directamente al desarrollo del LEA y que pudiera producir una predisposici&#243;n hacia la malignidad<span class="elsevierStyleSup">5</span>&#44; y b&#41; que&#44; como en numerosas lesiones cut&#225;neas&#44; sea un contaminante sin ninguna relaci&#243;n con el desarrollo de la enfermedad&#46; En el primer caso el virus actuar&#237;a como un ant&#237;geno localizado en los queratinocitos desencadenando fen&#243;menos inmunes de tipo retardado mediado por linfocitos citot&#243;xicos&#44; a los que se suman liberaci&#243;n de citocinas&#44; que atacan la membrana basal y las propias c&#233;lulas de la epidermis&#44; de ah&#237; la degeneraci&#243;n hidr&#243;pica de las c&#233;lulas basales en el per&#237;odo de actividad&#44; sumada a otros factores inmunes provocar&#237;an la hialinizaci&#243;n de las fibras col&#225;genas<span class="elsevierStyleSup">18</span>&#46; Se ha descrito en la inmunohistoqu&#237;mica&#44; la activaci&#243;n de los queratinocitos y linfocitos HLA DR&#43; &#44; linfocitos CD4&#43; y especialmente los CD8&#43; en la dermis&#44; lo mismo con las c&#233;lulas de Langerhans CD1a &#43; en la epidermis<span class="elsevierStyleSup">19&#44;20</span>&#46; Sin embargo&#44; nosotros apoyamos la hip&#243;tesis de la acci&#243;n pat&#243;gena del virus&#44; ya que con los tratamientos locales y orales no se consigui&#243; una remisi&#243;n importante sino cuando se asoci&#243; un tratamiento antiv&#237;rico espec&#237;fico local por tiempo prologado&#44; aunque discontinuo&#44; dada la acci&#243;n adversa de esta medicaci&#243;n&#46; 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Presencia del virus del papiloma humano en lesiones de liquen escleroso y atrófico vulvar. Estudio por inmunohistoquímica e hibridización in situ
Human papilloma virus infection in vulvar lesions of lichen sclherosus et atrophicus. Study by immunohistochemistry and in situ hibridization
Raúl Vignale Peiranoa, Gisele Acosta Dibarraza, José Paciel Vaza, Victoria González Domíngueza
a Departamento de Anatomía Patológica. Hospital de Clínicas Dr. Manuel Quintela. Facultad de Medicina. Montevideo (Uruguay).
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el virus del papiloma humano</span>9-15&#46; En este trabajo se describen dos pacientes que presentaban cl&#237;nica e histol&#243;gicamente lesiones de LEA en las que se investig&#243; la presencia del virus del papiloma humano &#40;VPH&#41; en la epidermis&#44; hall&#225;ndose positivo en ambos&#46; La presencia de este virus podr&#237;a constituir un factor antig&#233;nico para desarrollar distintos fen&#243;menos inmunol&#243;gicos locales caracter&#237;sticos del LEA y ser un cofactor para desarrollar m&#225;s tard&#237;amente un carcinoma espinocelular&#46;</p><p class="elsevierStylePara">DESCRIPCI&#211;N DE LOS CASOS</p><p class="elsevierStylePara">Cl&#237;nica</p><p class="elsevierStylePara">Caso 1</p><p class="elsevierStylePara">Mujer de 48 a&#241;os que consult&#243; en la Cl&#237;nica Ginecol&#243;gica por ardor y prurito en &#225;reas genitales&#46; En el examen f&#237;sico se observaron lesiones blanquecinas&#44; discretamente atr&#243;ficas&#44; en cara interna de labio mayor&#44; menor y regi&#243;n periuretral y clitoridiana&#46; No hab&#237;a lesiones en vagina&#44; ni en regiones perineal y perianal&#46; Tampoco se hallaban otras manifestaciones cut&#225;neas o sist&#233;micas de inter&#233;s&#46; La paciente ten&#237;a m&#250;ltiples relaciones sexuales con distintas parejas desconocidas&#46; Los an&#225;lisis de laboratorio&#44; incluyendo los de orden inmunol&#243;gico&#44; fueron normales&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Caso 2</p><p class="elsevierStylePara">Mujer de 38 a&#241;os&#44; diab&#233;tica tipo 2&#44; que consult&#243; por intenso prurito en zonas genitales&#44; acompa&#241;ado de dispareumia&#44; desde hac&#237;a 4 a&#241;os&#46; Al examen f&#237;sico se observ&#243; en la cara interna de labios mayores&#44; menores&#44; regi&#243;n del cl&#237;toris y perineal extensas placas blanquecinas&#44; brillantes&#44; de l&#237;mites difusos y muy dolorosas&#46; El examen ginecol&#243;gico demostr&#243; una cervicitis cr&#243;nica&#46; En m&#250;ltiples exudados vaginales se detect&#243; una candidiasis que fue tratada con relativo &#233;xito&#46; La paciente ten&#237;a una &#250;nica pareja sexual sin lesiones cl&#237;nicas en los genitales&#44; aunque nunca realiz&#243; an&#225;lisis espec&#237;ficos para el VPH&#46; Desde el punto de vista sist&#233;mico presentaba un bocio con hipertiroidismo&#46; Los an&#225;lisis de laboratorio fueron normales&#46;</p><p class="elsevierStylePara">La histopatolog&#237;a mostr&#243; en ambos casos lesiones similares de LEA en per&#237;odo de estado con marcada hiperqueratosis ortoquerat&#243;sica&#44; ausencia de granulosa y una epidermis atr&#243;fica&#44; sin crestas y sin degeneraci&#243;n hidr&#243;pica de la basal&#46; Destacamos que en la parte superior de la capa de Malphigi se observaban numerosos coilocitos &#40;fig&#46; 1&#41;&#46; En la dermis papilar y reticular alta las fibras col&#225;genas eran esclerosas&#46; Ausencia de infiltrado inflamatorio&#44; excepto algunos linfocitos de disposici&#243;n perivascular en la dermis reticular&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><img src="103v93n06-13034577fig01.jpg"></img></p><p class="elsevierStylePara">Fig 1&#46;--Histopatolog&#237;a de la epidermis con presencia de coilocitos en los queratinocitos&#46;</p><p class="elsevierStylePara">En el caso 1 se investig&#243; el VPH por el m&#233;todo de fluorescencia indirecta con anticuerpos monoclonales &#40;Biodesign&#44; Maine&#44; USA&#41; sobre c&#233;lulas epiteliales exfoliadas obtenidas por rascado de las lesiones previa asepsia&#46; Dicha prueba se repiti&#243; en tres oportunidades&#46; Las pruebas fueron positivas para el VPH cuando las c&#233;lulas mostraron un patr&#243;n de fluorescencia id&#233;ntico a los obtenidos por controles positivos para este virus&#46; En el caso 2 se realiz&#243; una biopsia por punch&#44; fijaci&#243;n en formol y los cortes se colorearon en l&#225;minas silanizadas para emplear la t&#233;cnica de hidridizaci&#243;n in situ&#46; Esta prueba fue efectuada con fluoresce&#237;na &#40;DAKO&#44; USA&#41; para VPH general&#46; Los cortes fueron desparafinados y pepsinizados durante 15 minutos&#44; luego denaturalizados a 95&#176; C durante 5 minutos&#44; posteriormente se efectu&#243; la hibridizaci&#243;n con HOOPV toda la noche &#40;37&#176; C&#41; y luego lavados con una soluci&#243;n a 48&#176; 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Cuando se le instituy&#243; localmente medicaci&#243;n con imiquimod &#40;1 hora por la noche&#44; en d&#237;as alternos durante 2 semanas&#44; y luego dos veces por semana durante 3 meses&#44; aunque en numerosas ocasiones se interrumpi&#243; dada su intensa acci&#243;n irritante&#41; la mejor&#237;a fue algo m&#225;s r&#225;pida&#44; tanto desde el punto de vista cl&#237;nico&#44; en su prurito que era incoercible&#44; como funcional en sus relaciones sexuales&#46; Es llamativo que despu&#233;s de 1 a&#241;o de tratamiento no se logr&#243; aislar por frotis el VPH&#46;</p><p class="elsevierStylePara">DISCUSI&#211;N</p><p class="elsevierStylePara">El VPH fue detectado por el m&#233;todo de fluorescencia en el caso 1 y por hidridizaci&#243;n in situ en el caso 2&#46; En todos se observ&#243; el virus en los n&#250;cleos de las c&#233;lulas epiteliales&#46; La t&#233;cnica m&#225;s sensible&#44; pero menos espec&#237;fica para afirmar la presencia del virus es la reacci&#243;n en cadena de la polimerasa &#40;PCR&#41;&#46; Con relaci&#243;n a la seguridad de la presencia para el VPH por ambas t&#233;cnicas empleadas en nuestros casos&#44; Zaki et al<span class="elsevierStyleSup">16</span> sostienen que no son de confianza en el sentido de una seguridad absoluta para la presencia del virus&#44; y Jablonska et al<span class="elsevierStyleSup">17</span> agregaron que la hidridizaci&#243;n in situ puede no ser sensible debido al defecto del bajo n&#250;mero de copias del VPH-ADN&#46; Sin embargo&#44; en el caso efectuado por la hidridizaci&#243;n fue muy demostrativa en las c&#233;lulas epiteliales&#44; lo que nos permite afirmar su presencia&#46; En cambio&#44; cuando los resultados son negativos no se descarta la presencia del virus&#46;</p><p class="elsevierStylePara">El LEA es una afecci&#243;n de no muy rara frecuencia&#44; con predomino en &#225;reas genitales&#44; que se caracteriza por lesiones blanquecinas&#44; brillantes&#44; en placas&#44; de l&#237;mites difusos&#44; bilaterales y sim&#233;tricas y de aspecto atr&#243;fico&#46; 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Una de sus posibles causas en este &#225;rea puede ser la presencia del VPH<span class="elsevierStyleSup">9-15</span>&#46; En este trabajo se estudiaron dos pacientes con lesiones de LEA vulvar en per&#237;odos de estado despu&#233;s de a&#241;os de evoluci&#243;n&#46; En ambas se encontr&#243; el VPH por dos m&#233;todos de laboratorio diferentes&#46; El hallazgo del virus del papiloma humano en nuestros casos nos plantea varias interrogantes&#58; a&#41; que el virus pueda estar vinculado directamente al desarrollo del LEA y que pudiera producir una predisposici&#243;n hacia la malignidad<span class="elsevierStyleSup">5</span>&#44; y b&#41; que&#44; como en numerosas lesiones cut&#225;neas&#44; sea un contaminante sin ninguna relaci&#243;n con el desarrollo de la enfermedad&#46; En el primer caso el virus actuar&#237;a como un ant&#237;geno localizado en los queratinocitos desencadenando fen&#243;menos inmunes de tipo retardado mediado por linfocitos citot&#243;xicos&#44; a los que se suman liberaci&#243;n de citocinas&#44; que atacan la membrana basal y las propias c&#233;lulas de la epidermis&#44; de ah&#237; la degeneraci&#243;n hidr&#243;pica de las c&#233;lulas basales en el per&#237;odo de actividad&#44; sumada a otros factores inmunes provocar&#237;an la hialinizaci&#243;n de las fibras col&#225;genas<span class="elsevierStyleSup">18</span>&#46; Se ha descrito en la inmunohistoqu&#237;mica&#44; la activaci&#243;n de los queratinocitos y linfocitos HLA DR&#43; &#44; linfocitos CD4&#43; y especialmente los CD8&#43; en la dermis&#44; lo mismo con las c&#233;lulas de Langerhans CD1a &#43; en la epidermis<span class="elsevierStyleSup">19&#44;20</span>&#46; Sin embargo&#44; nosotros apoyamos la hip&#243;tesis de la acci&#243;n pat&#243;gena del virus&#44; ya que con los tratamientos locales y orales no se consigui&#243; una remisi&#243;n importante sino cuando se asoci&#243; un tratamiento antiv&#237;rico espec&#237;fico local por tiempo prologado&#44; aunque discontinuo&#44; dada la acci&#243;n adversa de esta medicaci&#243;n&#46; 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Información del artículo
ISSN: 00017310
Idioma original: Español
Datos actualizados diariamente
año/Mes Html Pdf Total
2024 Noviembre 15 8 23
2024 Octubre 254 38 292
2024 Septiembre 214 40 254
2024 Agosto 317 79 396
2024 Julio 310 38 348
2024 Junio 264 43 307
2024 Mayo 250 37 287
2024 Abril 254 38 292
2024 Marzo 250 47 297
2024 Febrero 262 43 305
2024 Enero 283 43 326
2023 Diciembre 284 37 321
2023 Noviembre 277 44 321
2023 Octubre 236 16 252
2023 Septiembre 256 25 281
2023 Agosto 255 27 282
2023 Julio 311 29 340
2023 Junio 287 31 318
2023 Mayo 302 22 324
2023 Abril 226 22 248
2023 Marzo 250 33 283
2023 Febrero 190 17 207
2023 Enero 198 44 242
2022 Diciembre 149 20 169
2022 Noviembre 274 34 308
2022 Octubre 204 23 227
2022 Septiembre 220 37 257
2022 Agosto 219 41 260
2022 Julio 208 44 252
2022 Junio 228 20 248
2022 Mayo 179 32 211
2022 Abril 155 43 198
2022 Marzo 134 50 184
2022 Febrero 162 26 188
2022 Enero 202 43 245
2021 Diciembre 162 40 202
2021 Noviembre 144 34 178
2021 Octubre 136 45 181
2021 Septiembre 123 36 159
2021 Agosto 69 25 94
2021 Julio 117 29 146
2021 Junio 122 35 157
2021 Mayo 105 40 145
2021 Abril 211 57 268
2021 Marzo 133 21 154
2021 Febrero 137 25 162
2021 Enero 92 14 106
2020 Diciembre 85 24 109
2020 Noviembre 62 10 72
2020 Octubre 61 7 68
2020 Septiembre 74 14 88
2020 Agosto 97 13 110
2020 Julio 77 13 90
2020 Junio 77 26 103
2020 Mayo 68 34 102
2020 Abril 61 15 76
2020 Marzo 65 22 87
2020 Febrero 1 10 11
2020 Enero 0 6 6
2019 Diciembre 0 12 12
2019 Noviembre 1 6 7
2019 Octubre 4 10 14
2019 Septiembre 0 3 3
2019 Agosto 0 6 6
2019 Julio 2 10 12
2019 Junio 0 22 22
2019 Mayo 1 43 44
2019 Abril 1 54 55
2019 Marzo 0 16 16
2019 Febrero 0 15 15
2019 Enero 0 18 18
2018 Diciembre 5 5 10
2018 Noviembre 0 12 12
2018 Octubre 0 8 8
2018 Septiembre 2 2 4
2018 Junio 0 1 1
2018 Mayo 1 1 2
2018 Marzo 65 5 70
2018 Febrero 57 22 79
2018 Enero 77 14 91
2017 Diciembre 80 19 99
2017 Noviembre 89 19 108
2017 Octubre 113 28 141
2017 Septiembre 72 37 109
2017 Agosto 91 69 160
2017 Julio 72 28 100
2017 Junio 97 29 126
2017 Mayo 127 34 161
2017 Abril 89 28 117
2017 Marzo 183 59 242
2017 Febrero 484 16 500
2017 Enero 181 17 198
2016 Diciembre 166 23 189
2016 Noviembre 349 29 378
2016 Octubre 242 35 277
2016 Septiembre 254 20 274
2016 Agosto 159 18 177
2016 Julio 101 24 125
2016 Junio 15 14 29
2016 Mayo 11 6 17
2016 Abril 8 3 11
2016 Marzo 15 3 18
2016 Febrero 10 4 14
2016 Enero 18 19 37
2015 Diciembre 19 18 37
2015 Noviembre 23 13 36
2015 Octubre 16 19 35
2015 Septiembre 24 9 33
2015 Agosto 25 11 36
2015 Julio 181 14 195
2015 Junio 117 4 121
2015 Mayo 128 10 138
2015 Abril 173 10 183
2015 Marzo 200 5 205
2015 Febrero 172 9 181
2015 Enero 112 5 117
2014 Diciembre 100 5 105
2014 Noviembre 140 8 148
2014 Octubre 132 10 142
2014 Septiembre 126 15 141
2014 Agosto 131 19 150
2014 Julio 113 18 131
2014 Junio 133 13 146
2014 Mayo 146 25 171
2014 Abril 105 8 113
2014 Marzo 80 30 110
2014 Febrero 69 42 111
2014 Enero 64 20 84
2013 Diciembre 51 27 78
2013 Noviembre 70 30 100
2013 Octubre 78 19 97
2013 Septiembre 70 23 93
2013 Agosto 50 19 69
2013 Julio 65 37 102
2013 Junio 70 38 108
2013 Mayo 60 35 95
2013 Abril 75 26 101
2013 Marzo 61 30 91
2013 Febrero 73 19 92
2013 Enero 50 11 61
2012 Diciembre 69 14 83
2012 Noviembre 92 13 105
2012 Octubre 75 1 76
2012 Septiembre 7 2 9
2011 Mayo 8 0 8
2011 Abril 6 0 6
2011 Marzo 80 0 80
2011 Febrero 73 0 73
2011 Enero 51 0 51
2010 Diciembre 54 0 54
2010 Noviembre 49 0 49
2010 Octubre 12 0 12
2010 Septiembre 29 0 29
2010 Agosto 49 0 49
2010 Julio 39 0 39
2010 Junio 14 0 14
2010 Mayo 49 0 49
2010 Abril 53 0 53
2010 Marzo 17 0 17
2010 Febrero 3 0 3
2010 Enero 36 0 36
2009 Diciembre 33 0 33
2009 Noviembre 3 0 3
2009 Octubre 3 0 3
2009 Septiembre 8 0 8
2009 Agosto 4 0 4
2009 Julio 5 0 5
2009 Junio 7 0 7
2009 Mayo 4 0 4
2009 Abril 2 0 2
2009 Marzo 1 0 1
2009 Febrero 2 0 2
2008 Noviembre 1 0 1
2008 Septiembre 2 0 2
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2008 Julio 2 0 2
2008 Junio 5 0 5
2008 Mayo 5 0 5
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2008 Febrero 1 0 1
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